1 、产品介绍
Epoxy Activated NUPharose FF 和 Epoxy Activated NUPharose 6B 是基于 NUPharose 技术平台的环氧基团预活化填料,前者基于 4%交联琼脂糖,环氧基团活化密度较低(~5 μmol/mL),适合用于偶联大分子配基与扩大生产;后者基于 6%琼脂糖,环氧基团活化 密度高(>15 μmol/mL),适合用于偶联大、小分子的亲和配基。
2 、产品特点与技术指标
产品名称 | Epoxy Activated NUPharose FF | Epoxy Activated NUPharose 6B |
目录编号 | NRPB12L | NRPB75L |
基质 | 4%交联琼脂糖 | 6%琼脂糖 |
粒径范围 a | 45~165 μm | |
平均粒径 | ~90 μm | |
活化配基 | 亲水性环氧基团,~5 μmol/mL | 亲水性环氧基团,>15 μmol/mL |
推荐工作流速 | 60~300 cm/h | 10~50 cm/h |
最大流速与压力 b | >900 cm/h ,0.3 MPa | >150 cm/h ,0.3 MPa |
使用 pH | 7~9(偶联巯基);9~11(偶联氨基) | |
储存与运输 | 20%乙醇,2~8 ℃ | |
保质期 | 6 个月 |
注:a90%体积以上的微球在此粒径范围; b 10 cm 柱高下的最大测试流速。
3 、使用方法参考
1)在配基偶联前,准备好所有的样品、溶液、缓冲液等, 尽量减少每一步操作之间 的间隙。
2)偶联前用蒸馏水洗涤 10 个体积以上,去除保存液。
3)根据目标配基选择偶联溶液体系,一般情况下巯基偶联 pH 为 7-9,氨基偶联 pH 为 9-11,羟基偶联 pH 为>11。
4)可以在 20~40 ℃下偶联,一般提高温度能加速偶联,在偶联效果不好的情况下,可以提高温度至 35 ℃以上,但要考虑配基的稳定性。
5)偶联时间依据反应速度而定,通常可偶联过夜(16h)。
6)偶联配基后,剩余环氧基团需要封闭,可用半胱氨酸、乙醇胺、甘氨酸等小分子 试剂封闭数小时,如 0.2 M Na2CO3 + 0.1 M 乙醇胺,pH 10 ,37 ℃封闭 16h。
7)偶联完毕后用 pH 8~9 的 0.1 mol/L Tris-HCl 缓冲液和 pH4-5 、0.1mol/L 醋酸-醋 酸钠缓冲液依次冲洗,循环三遍,去除未偶联的残留配基。
8)偶联后的凝胶可保存在含抑菌剂的溶液中,如 20%乙醇。
4 、产品规格与订购信息
基于强大的研发实力和丰富的数据积累,除了下述标准型号的填料,纽龙生物接受 定制非标准型填料产品。纽龙生物竭力在最短时间内交付客户, 为客户提供最佳的产品 与服务。
5 、预活化填料产品线
针对不同的应用场景与需求,预活化填料基于 NUPharose、NuPerley 两类琼脂糖微球,微球的标准平均粒径有 35 μm、90 μm,详情请咨询纽龙生物销售部门与技术部门。