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NRPA05 重组链霉亲和素(r-SA)

发布日期:2023-10-31 阅读次数:19931

    名:重组链霉亲和素(Recombinant Streptavidin,r-SA 

  号:NRPA05S

    格:1 mg 10 mg 100 mg 500 mg

产品形式:冷冻干粉(5mM  磷酸钾盐缓冲液、海藻糖,pH 8.0

分 子 量:四聚体 62.4kDa,单体 15.6kDa(SDS-PAGE 检测单体约为 16.5 kDa) 

活    性:≥15U/mg 蛋白(Green 改良法测定)

纯    度:≥95%(SDS-PAGE 检测)

浓度测定:紫外吸收法,消光系数 E(0.1% at 280 nm)=3.22

内 毒 素:≤5EU/mg

    源:大肠杆菌发酵工程菌株 

保存条件:-20℃保存

有 效 期:3 年


相关介绍:

链霉亲和素(Streptavidin SA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces  avidinii)在生长过程中分泌的 一种同型四聚体蛋白。同亲和素一样,一摩尔的链霉亲和素可以结合四摩尔的生物素,与生物素具 有很高的亲和力。由于 SA 不含糖基且等电点接近于中性,因此 SA 在检测应用中具有比亲和素更 低的非特异性结合水平。

该制品已被广泛应用于多种生物技术领域,诸如:包被免疫检测用微孔板,制备 SA 偶联酶制 剂,SA 偶联荧光素、SA 偶联磁珠等,进而参与酶联免疫吸附和酶催化放大实验,免疫组化化学、 生物分子纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究和生物芯片被料等。 (该重组链霉亲 和素 C 端含 His-Tag 标签,pI7.0)

使用方法:(仅供参考)

由于产品生产工艺中冻干环节会引入保护剂等,为减少您的实验误差,建议先通过内部检测方 法,产品中蛋白进行准确定量后,再进行后续实验,并按实际情况进行产品用量调整。建议优先选 择紫外吸收法进行定量,方法如下:

将样品从低温条件下拿出后,平衡至室温,并擦去瓶外附着的冷凝水,小心打开瓶盖,防止干 粉飞溅损失。用去离子水或缓冲液进行复溶,充分溶解后,稀释至合适浓度,小心移入比色皿中, 以去离子水或缓冲液为空白对照,测定样品在 280 nm 处的吸光值(建议吸光值控制在 0.1-1.5 区间


),将其代入以下公式计算蛋白质浓度:

image.png 

式中:C:样品原液的蛋白质质量浓度(mg/mL

A280nm :蛋白质溶液在 280nm 处测得的吸光值 N:稀释倍数

E(0.1% at 280nm) 1 mg/mL 蛋白质的消光系数

例如将本产品冻干粉充分溶解并混匀后,取适量原液稀释 10 倍,测得其在280 nm 处的吸光值为0.966 则原液的蛋白浓度为 10×0.966/3.22=3 mg/mL

 

注意事项:

1.  链霉亲和素冻干粉易溶于水,溶解性可 10 mg / mL  或更高;

2.  建议使用纯水溶解;

3.  如有未溶解物质,建议延长复溶时间。也可以通过离心或其他方式除去不溶物后,再用于后 续实验,不会对总蛋白产生很大的影响。

        4.  考虑到蛋白质特殊性,冻干粉建议现用现配,溶解后应避免反复冻融,如需多次使用,建议 按需分装后冻存(-20℃) ;避免在4℃下长期存放。

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