品 名:重组长臂巯基核心链霉亲和素(Recombinant Long-ArmSulfhydryl Group Core Streptavidin, r-las-cSA)
目 录 号:NRPA45S
规 格:1 mg ,10 mg ,100 mg ,500 mg
产品形式:冷冻干粉(20mM HEPES 缓冲液、海藻糖、TCEP ,pH 7.0)
分 子 量:四聚体 54.8kDa,单体 13.7kDa
活 性:≥16 U/mg 蛋白(Green 改良法测定)
纯 度:≥95%(SDS-PAGE 检测)
浓度测定:紫外吸收法,消光系数 E(0.1% at 280 nm)=3.05
内 毒 素:≤5EU/mg
来 源:大肠杆菌发酵工程菌株
保存条件:-20℃保存
有 效 期:3 年
相关介绍:
链霉亲和素(Streptavidin,SA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)在生长过程中分泌的一 种同型四聚体蛋白。同亲和素一样,一摩尔的链霉亲和素可以结合四摩尔的生物素,与生物素具有 很高的亲和力。由于链霉亲和素不含糖基且等电点接近于中性,因此链霉亲和素在检测应用中具有 比亲和素更低的非特异性结合水平。重组长臂巯基核心链霉亲和素与天然链霉亲和素相比,去除与 活性无关的序列,仅保留与活性有关的核心序列,稳定性、溶解性等方面均优于天然链霉亲和素, 同时和纽龙生物链霉亲和素系列产品 A09 比,在 C 端的半胱氨酸前插入了 6 个额外的柔性氨基酸, 加长了 C 端巯基臂长度,可以让 SA 更好地定向与载体共价键合。(该重组长臂巯基核心链霉亲和素 pI:6.09)
该制品已被广泛应用于多种生物技术领域,诸如:包被免疫检测用微孔板,制备 SA 偶联酶制 剂,SA 偶联荧光素、SA 偶联磁珠等,进而参与酶联免疫吸附和酶催化放大实验,免疫组化化学、 生物分子纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究和生物芯片被料等。
使用方法:(仅供参考)
由于产品生产工艺中冻干环节会引入保护剂等,为减少您的实验误差,建议先通过内部检测方 法,产品中蛋白进行准确定量后,再进行后续实验,并按实际情况进行产品用量调整。建议优先选
择紫外吸收法进行定量,方法如下:
将样品从低温条件下拿出后,平衡至室温,并擦去瓶外附着的冷凝水,小心打开瓶盖,防止干 粉飞溅损失。用去离子水或缓冲液进行复溶,充分溶解后,稀释至合适浓度,小心移入比色皿中, 以去离子水或缓冲液为空白对照,测定样品在 280 nm 处的吸光值(建议吸光值控制在 0.1-1.5 区间 内),将其代入以下公式计算蛋白质浓度:
式中:C:样品原液的蛋白质质量浓度(mg/mL)
A280nm :蛋白质溶液在 280nm 处测得的吸光值 N:稀释倍数
E(0.1% at 280nm) :1 mg/mL 蛋白质的消光系数
例如将本产品冻干粉充分溶解并混匀后,取适量原液稀释 10 倍,测得其在 280 nm 处的吸光值为 0.915,则原液的蛋白浓度为 10×0.915/3.05=3 mg/mL。
注意事项:
1. 重组长臂巯基核心链霉亲和素冻干粉易溶于水,溶解性可达 10 mg / mL 或更高;
2. 建议使用纯水溶解;
3. 如有未溶解物质,建议延长复溶时间。也可以通过离心或其他方式除去不溶物后,再用于后 续实验,不会对总蛋白产生很大的影响。
4. 考虑到蛋白质特殊性,冻干粉建议现用现配,溶解后应避免反复冻融,如需多次使用,建议 按需分装后冻存(-20℃) ;避免在4℃下长期存放。