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NRPA45 重组长臂巯基核心链霉亲和素(r-las-cSA)

发布日期:2018-10-25 阅读次数:6076

    名:重组长臂巯基核心链霉亲和素(Recombinant Long-ArmSulfhydryl Group Core Streptavidin, r-las-cSA

  号:NRPA45S

    格:1 mg 10 mg 100 mg 500 mg

产品形式:冷冻干粉(20mM HEPES 缓冲液、海藻糖、TCEP pH 7.0 

  量:四聚体 54.8kDa,单体 13.7kDa

    性:≥16 U/mg 蛋白(Green 改良法测定) 

    度:≥95%SDS-PAGE 检测)

浓度测定:紫外吸收法,消光系数 E(0.1% at 280 nm)=3.05 

  素:≤5EU/mg

    源:大肠杆菌发酵工程菌株 

保存条件:-20℃保存

  期:3  


相关介绍:

链霉亲和素(StreptavidinSA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)在生长过程中分泌的一 种同型四聚体蛋白。同亲和素一样,一摩尔的链霉亲和素可以结合四摩尔的生物素,与生物素具有 很高的亲和力。由于链霉亲和素不含糖基且等电点接近于中性,因此链霉亲和素在检测应用中具有 比亲和素更低的非特异性结合水平。重组长臂巯基核心链霉亲和素与天然链霉亲和素相比,去除与 活性无关的序列,仅保留与活性有关的核心序列,稳定性、溶解性等方面均优于天然链霉亲和素, 同时和纽龙生物链霉亲和素系列产品 A09 比,在 C 端的半胱氨酸前插入了 6 个额外的柔性氨基酸, 加长了 C 端巯基臂长度,可以让 SA 更好地定向与载体共价键合。(该重组长臂巯基核心链霉亲和素 pI6.09)

该制品已被广泛应用于多种生物技术领域,诸如:包被免疫检测用微孔板,制备 SA  偶联酶制 剂,SA 偶联荧光素、SA 偶联磁珠等,进而参与酶联免疫吸附和酶催化放大实验,免疫组化化学、 生物分子纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究和生物芯片被料等。

使用方法:(仅供参考)

由于产品生产工艺中冻干环节会引入保护剂等,为减少您的实验误差,建议先通过内部检测方 法,产品中蛋白进行准确定量后,再进行后续实验,并按实际情况进行产品用量调整。建议优先选


择紫外吸收法进行定量,方法如下:

将样品从低温条件下拿出后,平衡至室温,并擦去瓶外附着的冷凝水,小心打开瓶盖,防止干 粉飞溅损失。用去离子水或缓冲液进行复溶,充分溶解后,稀释至合适浓度,小心移入比色皿中, 以去离子水或缓冲液为空白对照,测定样品在 280 nm 处的吸光值(建议吸光值控制在 0.1-1.5 区间 ),将其代入以下公式计算蛋白质浓度:

image.png 

式中:C:样品原液的蛋白质质量浓度(mg/mL

A280nm :蛋白质溶液在 280nm 处测得的吸光值 N:稀释倍数

E(0.1% at 280nm) 1 mg/mL 蛋白质的消光系数

例如将本产品冻干粉充分溶解并混匀后,取适量原液稀释 10  倍,测得其在 280 nm  处的吸光值为 0.915,则原液的蛋白浓度为 10×0.915/3.05=3 mg/mL

 

注意事项:

1.  重组长臂巯基核心链霉亲和素冻干粉易溶于水,溶解性可达 10 mg / mL  或更高;

2.  建议使用纯水溶解;

3.  如有未溶解物质,建议延长复溶时间。也可以通过离心或其他方式除去不溶物后,再用于后 续实验,不会对总蛋白产生很大的影响。

         4.  考虑到蛋白质特殊性,冻干粉建议现用现配,溶解后应避免反复冻融,如需多次使用,建议 按需分装后冻存(-20℃) ;避免在4℃下长期存放。

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